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大肠埃希氏菌平板计数法是利用大肠埃希氏菌在VRBA-MUG上显蓝白色荧光，来计数大肠埃希氏菌的，相比于MPN法，操作过程更加简单，但此种方法，不适用于贝类。
1、 倾注平板
首先，取VRBA、VRBA-MUG培养基，按照标签说明进行称量溶解，将VRBA、VRBA-MUG培养基，置于微波炉上加热煮沸灭菌，煮沸2-3次，之后放置于45℃±0.5℃水浴锅中备用。
选取2个~3个适宜的连续稀释度的样品匀液，本次采用原液、-1、-2梯度的样品匀液进行实验，每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿1 mL。同时取1 mL稀释液加入无菌平皿做空白对照。同时采用已知MUG阳性菌株（如大肠埃希氏菌25922）和产气肠杆菌（如ATCC 13048）做阳性和阴性对照。
将10 mL~15 mL冷至45℃±0.5℃的结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）倾注于每个平皿中（注意：倾注时的温度不能过高，否则会发生菌株死亡）。小心旋转平皿，将培养基与样品匀液充分混匀。（注意1：可在需倾注的平皿下方叠放一个空平皿，防止桌面太待琼脂凝固后，再加3 mL~4 mL VRBA-MUG覆盖平板表层，凝固后翻转平板，36℃±1℃培养18 h~24 h。
2、 平板菌落数的选择
选择菌落数在10 CFU~100 CFU之间的平板，暗室中360 nm~366 nm波长紫外灯照射下，计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。
3、 大肠埃希氏菌平板计数的报告
两个平板上发荧光菌落数的平均数乘以稀释倍数，报告每g（mL）样品中大肠埃希氏菌，以CFU/g（mL）表示。若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告。