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单增李斯特氏菌的生化鉴定


单增李斯特氏菌的生化鉴定操作视频 往期回顾:
在之前单增李斯特氏菌的初步检测实验视频中,我们分离出了可疑菌落,(此处可贴图放大展示)本期视频就来继续讲解单增李斯特氏菌的生化鉴定,进一步来确定可疑菌落是否为单增李斯特氏菌。
革兰氏镜检:
挑取纯培养的可疑菌落进行革兰氏镜检,单增李斯特氏菌为革兰氏阳性短杆菌。
生化实验:
取一盒银河澳门官网入口HBI单增李斯特氏菌生化鉴定条,其中包含了单增李斯特氏菌的各项生化,除了5条生化鉴定条外,还包含一盒SIM生化管和一盒过氧化氢酶试剂。
(1)动力实验
取一支sim生化管或半固体生化管,挑取纯培养的单个可疑菌落,穿刺于生化管中,之后置于25℃~30℃培养48h。李斯特氏菌有动力,在半固体或SIM培养基上呈伞状生长,如伞状生长不明显,可继续培养5d,再观察结果。
(2)过氧化氢酶实验
用一次性接种针挑取单个可疑菌落,置于干净的载玻片上(不可使用金属接种环),在易折点处掰开过氧化氢酶试剂,用移液枪吸取适量试剂,滴加在菌落上,30s内产生大量气泡,为过氧化氢酶阳性。单增李斯特氏菌为阳性反应。
(3)糖发酵试验和MR-VP试验
选择过氧化氢酶为阳性的纯培养的菌落,接种至无菌生理盐水管中,充分振荡混匀制成均一的菌悬液,
取一支生化鉴定条,打开盖子,用酒精棉擦拭鉴定条表面及打孔器,依次打孔,用移液枪吸取待测菌菌悬液,每孔加入100ul,接种完毕后,盖上盖子,置于36℃±1℃培养。
培养结束后,在第7孔滴加甲基红试剂,第8孔滴加VP试剂甲液3滴,乙液1滴放在记录卡上观察。进行单增李斯特氏菌结果描述。
注意:vp实验需要在滴加试剂后,4h内观察结果。变红为阳性。
除了进行上述生化实验外,单增李斯特氏菌还需进行溶血实验,才能最终确定,敬请期待后续视频!

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