初步鉴定
氧化酶试验：取约50 μL蒸馏水将氧化酶试纸浸湿，挑选纯培养的单个菌落进行氧化酶试验，用细玻璃棒或一次性接种环（针）挑取单个菌落，涂在试纸上。在30s内变为蓝色或蓝紫色为阳性，不变色为阴性。副溶血性弧菌为氧化酶阳性。
涂片镜检：将可疑菌落涂片，进行革兰氏染色，镜检观察形态。副溶血性弧菌为革兰氏阴性，呈 棒状、弧状、卵圆状等多形态，无芽胞，有鞭毛。
挑取纯培养的单个可疑菌落，转种3%氯化钠三糖铁琼脂斜面并穿刺底层，36 ℃±1 ℃培养 24 h，观察结果。副溶血性弧菌在3%氯化钠三糖铁琼脂中的反应为底层变黄不变黑，无气泡，斜面颜色不变或红色加深，有动力（动力补充试验：使用3%氯化钠V-P半固体进行动力试验，使用接种针挑取菌苔穿刺接种于3%氯化钠V-P半固体培养基中，结果为沿穿刺线生长且扩散生长，表明有鞭毛有动力）
嗜盐性试验：挑取纯培养的单个可疑菌落，分别接种 0%、6%、8%和 10%不同氯化钠浓度的胰胨水，36 ℃±1 ℃培养 24 h，观察液体混浊情况。副溶血性弧菌在无氯化钠和 10%氯化钠的胰胨水中不生长或微弱生长，在6%氯化钠和 8%氯化钠的胰胨水中生长旺盛
确定鉴定
取纯培养物制备成菌悬液，分别接种100 μL菌悬液至含3%氯化钠的甘露醇试验培养基（阳性为黄色，阴性为蓝色或蓝绿色）、赖氨酸脱羧酶试验培养基（注意：同时做氨基酸脱羧酶对照试验，均加灭菌石蜡覆盖培养基液面；本管变紫色或紫红色，对照管变黄色，为阳性；本管与对照管均变黄色为阴性。）、MR-VP培养基［培养结束需滴加VP试剂（甲液6滴，乙液2滴），混匀后继续放置，4h之内变红则为阳性，棕黄色或不变色为阴性］。以上所有生化试验均在36 ℃±1 ℃培养箱中培养 24 h～48 h 后观察结果；
取3%氯化钠三糖铁琼脂隔夜培养物制备成菌悬液，接种100 μL菌悬液至含3%氯化钠ONPG生化管中进行 ONPG 试验（阳性为淡黄或黄色，阴性无颜色）。
结果与报告
根据检出的可疑菌落生化性状，报告 25 g（mL）样品中检出副溶血性弧菌。如果进行定量检测，根据证实为副溶血性弧菌阳性的试管管数，查最可能（MPN）检索表，报告每 g（mL）副溶血性弧菌的MPN值。副溶血性弧菌菌落生化性状和与其他弧菌的鉴别情况分别见表2和表3。
