一、培养基用途:
用于啤酒中乳酸菌检测的分离培养基。
二、原理:
酵母浸粉、酪胨和肝浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、麦芽糖和果糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;柠檬酸铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和N-乙酰葡萄糖胺为培养各种乳酸菌提供生长因子;本培养基pH较低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;琼脂是培养基的凝固剂。为增加选择性可加入2-苯乙醇和放线菌酮,可抑制革兰氏阴性菌和酵母菌。
三、培养基成分
成分 |
含量(g/L) |
酵母浸粉 |
5.0 |
酪胨 |
20.0 |
肝浸粉 |
1.0 |
麦芽糖 |
10.0 |
果糖 |
5.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
盐酸甜菜碱 |
2.0 |
柠檬酸铵 |
2.0 |
天门冬氨酸钾 |
2.5 |
硫酸镁 |
0.98 |
硫酸锰 |
0.42 |
磷酸氢二钾 |
2.0 |
N-乙酰葡萄糖胺 |
0.5 |
谷氨酸钾 |
2.5 |
琼脂 |
16 |
pH 5.2-5.6 25℃ |
四、操作方法
1、称取本品74.9g,另取吐温80 10g,混匀,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,制备成平板备用。
注:该培养基溶解后可能出现少量沉淀。
2、制备质控菌液
3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀的涂布于平板上,每一稀释度涂布两个平板。
4、36±1℃培养48±2小时,记录实验结果。
五、实验结果
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
其他特征 |
嗜酸乳杆菌 |
CICC6005 |
10-100CFU |
白色凸起菌落 |
植物乳杆菌 |
ATCC8014 |
10-100CFU |
白色凸起菌落 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
抑制或部分抑制 |
注:A为嗜酸乳杆菌;B为植物乳杆菌;C为大肠埃希氏菌
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