一、实验原理
荚膜是细菌细胞壁外的一层粘液性多糖类物质,其对染料的亲和力较弱,因此不容易着色,通常采用负染色法染色,让菌体和背景着色而荚膜不着色,从而使菌体周围呈现透明圈。由于荚膜本身含水量较多,质地疏松且单薄,因此在染色的时候不能加热固定,以免荚膜受热皱缩变形。荚膜染色可用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、炭疽芽孢杆菌以及产气荚膜梭菌的鉴定。
二、试验方法
1、制作适当厚度的细菌涂片,在空气中自然干燥,不需要加热固定。
2、滴加适量的A试剂于载玻片上,需将菌体完全覆盖,染色5-7分钟。
3、用B试剂冲洗涂片,冲洗要适度,2-3遍即可。
4、用吸水纸吸干,并立刻滴加1-2滴香柏油到涂片上,以防止结晶的形成。
5、由低倍镜开始调节视野,最终在油镜下观察染色结果。
三、实验结果
背景为蓝紫色,菌体紫色,荚膜为无色或者浅紫色。如下图所示:
四、注意事项
1、染色程度可通过改变染色时间做适当的调整。
2、脱色时不可用水冲洗,必须用B液。
3、不能加热干燥固定涂片,以避免荚膜皱缩。
4、可多挑一些菌苔与水充分混合,并将粘稠的菌液尽量涂布均匀。
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