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山梨醇麦康凯琼脂基础原理及实验现象

张文慧
录入时间:2021-3-10 13:48:28 来源:青岛银河澳门官网入口

一、用途


 用于大肠杆菌O157:H7菌的选择性分离培养。


二、实验原理


 蛋白胨、䏡胨提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;山梨醇为可发酵的糖类;牛胆盐、结晶紫、亚碲酸钾和头孢克肟抑制革兰氏阳性菌;中性红为pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。


三、培养基配方(g/L)


蛋白胨

17.0

䏡胨

3.0

山梨醇

10.0

牛胆盐

1.5

氯化钠

5.0

中性红

0.03

结晶紫

0.001

琼脂

13.5

pH7.2±0.2 

25℃

此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果

四、试验方法


 1、称取本品51.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃左右时,加入一支山梨醇麦康凯琼脂添加剂(含头孢克肟0.01mg,亚碲酸钾0.5mg),混匀,倾入无菌平皿,备用;


 2、制备质控菌液;


 3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板;


 4、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板;


 5、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。


五、结果观察与解释


 接种以下质控菌株,在36±1℃需氧培养18-24小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

金黄色葡萄球菌

ATCC6538

/

/

半定量

G≤1

/

大肠埃希氏菌O157

ATCC35150

10-100

TSA

定量

PR≥0.5

无色菌落,褐色中心

伤寒沙门氏菌

ATCC14028

/

/

定性

-

粉红色菌落

大肠埃希氏菌

ATCC25922



定性

-

粉红色菌落,周围有胆盐沉淀


 山梨醇麦康凯琼脂质控结果:






大肠埃希氏菌O157

无色菌落,褐色中心




大肠埃希氏菌

粉红色菌落,周围有胆盐沉淀











伤寒沙门氏菌

粉红色菌落




金黄色葡萄球菌

抑制


六、注意事项


 本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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  注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。


 

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