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    大肠埃希氏菌生化鉴定解析

    纪英姿
    录入时间:2020-11-23 10:34:41 来源:青岛银河澳门官网入口

    一、参考标准


      根据《GB4789.38-2012 大肠埃希氏菌计数》中定义,大肠埃希氏菌广泛存在于人和温血动物的肠道中,能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气,IMViC(靛基质、甲基红、VP试验、柠檬酸盐)生化试验为++--或-+--的革兰氏阴性杆菌。


    二、生化验证


      1、从分离平板中挑取可疑菌落,接种至乳糖发酵培养基(或EC肉汤培养基),44.5℃培养24h,观察实验结果。典型的大肠埃希氏菌在乳糖发酵培养基中产酸产气,培养基由紫色变为黄色,导管中有气体,有时液面处可见大量气泡(在EC肉汤中可观察到导管内有气体产生)。


    乳糖发酵培养基试验现象

    备注:a为大肠埃希氏菌ATCC25922,b为乙型副伤寒沙门氏菌,c为大肠埃希氏菌CMCC44102,d为空白对照


      2、从分离平板中挑取疑似菌,进行IMViC生化实验,接种至蛋白胨水、MR-VP、西蒙氏枸橼酸盐培养基(可选用大肠杆菌鉴定条或成套生化鉴定管等),36±1℃培养24-48h,记录生化反应结果。大肠埃希氏菌IMViC试验为++--或-+--(大多数大肠埃希氏菌反应为++--,-+--反应的大肠埃希氏菌较为少见)。


      注:靛基质试验需在培养结束后,在蛋白胨水中滴加靛基质试剂,立即或数秒内出现玫红色环为阳性反应,黄色环为阴性反应;甲基红试验需在培养结束后,在MR-VP培养基中滴加甲基红试剂,立即显红色为阳性反应,橙黄色为阴性反应;V-P试验需在培养结束后滴加V-P试剂,继续培养0.5-4h,如出现变红现象即为阳性反应,不变红为阴性反应;西蒙氏枸橼酸盐可直接观察结果,如出现变蓝即为阳性反应,不变色为阴性反应。


      3、革兰氏染色。在挑取疑似菌落后对其疑似菌落进行革兰氏染色(革兰氏染色液方法 点击查看相关文章),大肠埃希氏菌为革兰氏阴性杆菌,革兰氏染色结果为红色短杆菌。


         

    革兰氏染色液微生物质控结果 

    备注:红色杆菌为大肠埃希氏菌,紫色球菌为金黄色葡萄球菌


    三、结果判定


      若待测菌能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气,并且同时满足IMViC(靛基质、甲基红、VP试验、柠檬酸盐)生化试验为++--或-+--的革兰氏阴性杆菌,即可判定为大肠埃希氏菌。


    四、注意事项


      极少数不活跃大肠埃希氏菌为乳糖迟缓发酵或不发酵类型,在乳糖发酵培养基或EC肉汤培养基中观察不到产酸产气现象,需结合其他生化反应进行判断。


      注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

     

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