一、试验原理:
用于乳制品中嗜冷菌菌落总数和需氧芽孢总数的测定。
胰蛋白胨、脱脂奶粉提供碳源和氮源;酵母浸膏提供B族维生素;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
胰蛋白胨 |
5.0 |
酵母浸膏 |
2.5 |
葡萄糖 |
1.0 |
琼脂 |
15.0 |
脱脂奶粉 |
1.0 |
pH 7.0±0.1 |
25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
三、试验方法:
1、称取本品24.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。
2、使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
3、制备质控菌液。
4、选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。
5、6.5±0.5℃倒置培养基培养10天,记录实验结果。
四、结果观察与解释
1、理化指标
检测项目 |
标准指标 |
水份(%) |
<6 |
pH值(25℃) |
6.9-7.1 |
澄清度 |
溶液稍浑 |
软硬度 |
适中 |
干粉颜色 |
淡黄色 |
制备好的培养基的颜色 |
淡黄色固态 |
嗜冷菌计数琼脂干粉状态
2、微生物试验
接种以下质控菌株,6.5±0.5℃需氧培养10天:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
单增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
无色透明小菌落 |
小肠结肠炎耶尔森菌 |
ATCC23715 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
白色菌落 |
MPC琼脂培养基微生物质控结果
备注:a:单增李斯特氏菌,b:小肠耶尔森氏菌
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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