鸟氨酸脱羧酶实验视频
操作步骤:
1.取一支鸟氨酸脱羧酶肉汤生化管,做好标记,在易折点处(即瓶颈上方蓝点)掰开安瓿瓶,备用。
2.用移液枪吸取100ul的已稀释好的福氏志贺氏菌悬液(接种量>5000cfu)加入到生化管中,混合均匀,然后需加100ul的无菌液体石蜡覆盖培养基液面。无菌液体石蜡用来隔绝氧气,不加会影响试验结果的判定。
3. 用相同方法接种鼠伤寒沙门氏菌,并同时各接种一支对照管(氨基酸脱羧酶对照管),之后放置于36℃培养箱培养24h。
结果观察:
发现接种的福氏志贺氏菌的生化管变为黄色并且浑浊,结果为阴性。
而接种鼠伤寒沙门氏菌的生化管为紫色且浑浊,结果为阳性
。
实验原理:
这是因为细菌首先分解培养基中的葡萄糖产酸使培养基变成黄色,
而具有鸟氨酸脱羧酶的细菌,可分解鸟氨酸使其脱羧生成腐胺和二氧化碳,使培养基变碱,因此培养基又变回紫色。
特别注意:
本实验必须同时接种对照管,若对照管和鸟氨酸脱羧酶肉汤生化管均为紫色,说明试验菌为氧化型细菌或产碱型细菌,则不能判断该反应的阴阳性。