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马尿酸钠水解实验操作视频

 

马尿酸钠水解实验实验原理:
马尿酸钠水解实验通常用于空肠弯曲菌的鉴定,也可用于军团菌、乳酸菌、B族链球菌的鉴定。
这些细菌具有马尿酸钠水解酶,可将马尿酸钠水解为甘氨酸和苯甲酸,甘氨酸可与茚三酮反应生成紫色化合物。

操作步骤:
1. 取出马尿酸钠生化管,置于安瓿瓶试管架中,做好标记,包括菌株名称、菌株编号,在易折点处(即瓶颈上方蓝点)掰开安瓿瓶,备用。
2. 用接种环挑取空肠弯曲菌的大量菌苔接种至生化管,混合均匀,相同方法接种结肠弯曲菌,并设置一支空白对照,放置于36℃水浴2h,也可放置于36℃培养箱培养4h。

3. 下面配制3.5%(水合)茚三酮溶液,用移液枪分别吸取5mL丙酮和丁醇,至棕色瓶中混合均匀,称取0.35g(水合)茚三酮溶解于丙酮/丁醇混合溶液中,备用。

4. 培养结束后,取出生化管,用移液枪吸取0.2mL茚三酮溶液,沿着管壁缓慢加入管中,不可振荡,再置于36℃水浴10min或培养箱中温育10min,观察试验结果。

结果判断:

温育结束后,取出生化管,观察试验结果,接种空肠弯曲菌的生化管变为深紫色,为阳性结果;接种结肠弯曲菌的生化管为黄色,与空白对照一致,为阴性结果。

注意事项:

1. 此试验需用新鲜的菌,接种时需挑取大量菌体(接种环一满环),若接种量太少可能会出现假阴性;

2. 掰开安瓿瓶时最好包裹纱布,以免划伤手指;

1%马尿酸钠生化鉴定管应放置与-20℃保存;

4. 茚三酮溶液最好现配现用,如需保存,可在避光冷藏条件下保存不超过7d。

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