绿脓菌素(PDP)测定实验
操作步骤:
1、 首先,用接种环挑取铜绿假单孢菌的新鲜纯培养物,划线接种与PDP斜面管上,盖上盖子,注意瓶盖不可太紧,避免因为氧气不足影响色素的生成。37℃培养24h,如果色素不明显可适当延长培养时间至48小时。
2、 培养结束后,取出PDP管,可发现斜面上有绿色色素。加入5毫升的三氯甲烷,用钥匙或玻璃棒将斜面捣碎,并静止20分钟,让绿脓菌素被充分提取到三氯甲烷中。
3、 将三氯甲烷转移至另一支试管中,加入1毫升1MOL/L的盐酸,震荡后静止观察,可发现在试管上部有明显的红色反应,这是因为当加入盐酸溶液并震荡后,绿脓菌素会由三氯甲烷转移至盐酸溶液中,并在酸性环境中呈红色。