生物学特性:
洋葱伯克霍尔德菌为革兰阴性杆菌,对营养要求不高,一般在普通培养基生长良好,最适合生长温度为30℃,在4℃不生长,42℃生长不定。
分布范围:
洋葱伯克霍尔德菌存在于土及水中,在医院环境中常污染自来水体温计喷雾器、血管导管、导尿管、静脉输液器等,因而可多种医院内感染,包括败血症、心内膜炎、肺炎、伤口感染、脓肿、眼结膜炎等,是条件致病菌。其细胞膜的不通透性使其对大多数抗生素产生耐药,在医院易引起暴发流行,是医院感染的重要病原菌之一。
检验流程:
根据SN/T4684-2016进出口化妆品洋葱伯克霍尔德菌检验方法规定,检验流程如下:
典型菌落特征:
含多粘菌素B、庆大霉素的BCSA琼脂:红色圆形菌落,表面光滑,周围培养基变红
含多粘菌素B、庆大霉素的麦康凯琼脂:浅黄褐色圆形菌落,表面光滑,周围培养基不变色
生化鉴定:
葡萄糖氧化实验:
挑取可疑菌落,接种于2 支葡萄糖发酵管,其中一支加灭菌液体石蜡封口,另一支不封口,36℃土1℃,24h。二者均变黄为葡萄糖发酵型,未加石蜡管变黄而加石蜡管不变色为葡萄糖氧化型。
选择葡萄糖氧化型,在营养琼脂平板上划线纯化培养,36℃士1℃,24 h。纯培养养物继续进行鉴定。
革兰氏染色:
挑取可疑菌落涂片,进行革兰氏染色。显微镜镜下观察,洋葱伯克霍尔德菌为革兰氏阴性无芽孢杆菌。
氧化酶试验:
用玻璃棒或一次性接种针挑取单个特征性菌落,涂布在氧化酶试剂湿润的滤纸平板上。洋葱伯克霍尔德菌为迟缓型氧化酶阳性(紫红色、紫色、或深蓝色),反应时间约为2min - 10min。
注:实验中切勿使用镍/铬材料
过氧化氢酶实验:
用玻璃棒或一次性接种针挑取单个特征性菌落,置于洁净室管内,滴加3%过氧化氢溶液(临用时配置)2ml,观察气泡产生情况。洋葱伯克霍尔德菌为迟缓产气,1s后出现气泡。
蔗糖氧化实验:
挑取可疑菌落接种于蔗糖氧化培养基上,36℃±1℃,24h。培养基变黄色为阳性,蓝色为阴性。洋葱伯克霍尔德菌为阳性反应。
枸橼酸盐利用:
挑取可疑菌落接种于西蒙氏枸橼酸盐培养基,36℃±1℃培养24h,培养基变蓝色为阳性,浅绿色为阴性。洋葱伯克霍尔德菌为阳性反应。
七叶苷利用:
挑取可疑菌落接种于七叶苷培养基,30℃士1℃培养 24 h ,培养基变黑色为阳性,不变色为阴性。洋葱伯克霍尔德菌为阳性反应。
葡萄糖 |
革兰氏染色 |
氧化酶 |
过氧化氢酶 |
蔗糖 |
枸橼酸盐 |
七叶苷 |
氧化型 |
阴性 |
迟缓型氧化酶阳性 |
阳性 |
阳性 |
阳性 |
阳性 |
进口化妆品洋葱伯克霍尔德菌检验用培养基(SN/T4684-2016)
用途 | 货号 | 名称 | 规格 |
增菌 | HB5181-4 | 含多粘菌素B的SCDLP液体培养基 | 250g |
添加剂 | HB4131a | 多粘菌素B | 2.5万单位/支*5 |
增菌 | HB9118 | 含庆大霉素的BCSA增菌液 | 250g |
添加剂 | HB9118a | 庆大霉素溶液 | 1mg/支*5 |
分离 | HB9119 | 含多粘菌素B、庆大霉素的BCSA琼脂 | 250g |
添加剂 | HB4131a | 多粘菌素B | 2.5万单位/支*5 |
添加剂 | 待定 | 庆大霉素溶液 | 1mg/支*5 |
分离 | HB9120 | 含多粘菌素B\庆大霉素的麦康凯琼脂 | 250g |
添加剂 | HB4131a | 多粘菌素B | 2.5万单位/支*5 |
添加剂 | HB9118a | 庆大霉素溶液 | 1mg/支*5 |
生化 | HB8650 | 3%过氧化氢酶 | 20支 |
HB2100 | 氧化酶试纸 | 10片 | |
SN094 | 葡萄糖氧化/发酵管 | 20支 | |
SN093 | 蔗糖氧化生化管 | 20支 | |
GS011 | 西蒙氏枸橼酸盐 | 20支 | |
GS021 | 七叶苷 | 20支 |
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