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0.5%碱性复红使用方法及现象

纪旭艳
录入时间:2019-11-15 9:24:10 来源:青岛银河澳门官网入口

一、用途及原理

苏云金芽孢杆菌在形成芽孢的同时,会在芽孢旁边生成一颗菱形、方形或不规则形状的碱溶性蛋白晶体,称为伴孢晶体。该晶体易被碱性染料着色,用碱性复红染色后,可在显微镜下观察到深红色晶体。

此现象为苏云金芽孢杆菌的特征反应,在《GB4789.14-2014 蜡样芽胞杆菌检验》中,该实验为区分蜡样芽胞杆菌和苏云金芽孢杆菌的唯一方法。

二、成分

碱性复红···············0.5g

乙醇·················20mL

蒸馏水················80mL

三、操作方法

1、挑取纯培养的单个可疑菌落接种于硫酸锰营养琼脂平板上,30℃±1℃培养24 h±2 h, 并于室温放置3 d~4 d;

2.挑取培养物少许于载玻片上,滴加蒸馏水混匀并涂成薄膜。经自然干燥,微火固定;

3.加甲醇作用30 s后倾去,再通过火焰干燥,于载玻片上滴满0.5%碱性复红,放火焰上加热(微见蒸气,勿使染液沸腾)持续1 min~2 min,移去火焰,再更换染色液再次加温染色30 s,倾去染液用洁净自来水彻底清洗、晾干后镜检。

4.油镜下观察有无游离芽胞(浅红色)和染成深红色的菱形蛋白结晶体。

四、试验结果

①形态的深红色菱形或方形晶体为伴孢晶体

②形态的椭圆形或卵圆形物的为菌体芽孢,一般很难着色

③形态的红色杆状物为苏云金芽孢杆菌菌体

注:如发现游离芽胞形成的不丰富,应再将培养物置室温2d~3d后进行检查。 除苏云金芽胞杆菌外,其他芽胞杆菌不产生蛋白结晶体。

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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

 

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