一、试验原理:
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤用于多管发酵法测定大肠菌群和粪大肠菌群。
胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是培养基pH的缓冲剂;月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群细菌的生长。
二、培养基配方(g/L):
胰蛋白胨 氯化钠 乳糖 磷酸二氢钾 磷酸氢二钾 月桂基硫酸钠 |
20.0 5.0 5.0 2.75 2.75 0.1 |
pH值6.8±0.2(25℃) |
三、试验方法:
称取本品35.6克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。
四、质量控制和典型特征
在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其它细菌无气泡。
五、微生物灵敏度试验:
接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
方法 |
参比或计数培养基 |
质控结果 |
其他特征 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
半定量 |
TSA |
浑浊度2,不产气 |
/ |
弗氏柠檬酸杆菌 |
ATCC 43864 |
10-100 |
半定量 |
TSA |
浑浊度2,且气体充满管内1/3 |
/ |
阴沟肠杆菌 |
ATCC 23355 |
10-100 |
半定量 |
TSA |
浑浊度2,且气体充满管内1/3 |
/ |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
10-100 |
半定量 |
TSA |
浑浊度2,且气体充满管内1/3 |
/ |
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
1000-5000 |
半定量 |
TSA |
浑浊度0(不生长) |
/ |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
1000-5000 |
半定量 |
TSA |
浑浊度0(不生长) |
/ |
A:弗氏柠檬酸杆菌;B:大肠埃希氏菌;C:阴沟肠杆菌;D:鼠伤寒沙门氏菌;E:粪肠球菌;F:金黄色葡萄球菌;G:空白对照;
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