一、用途:
用于微生物山梨醇发酵试验。
二、实验原理:
此培养基内的糖醇类仅有山梨醇,若细菌能发酵山梨醇,则产酸使溶液pH下降,指示剂颜色变黄;若不能发酵山梨醇,则溶液颜色不变。
三、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
氯化钠 |
5.0 |
山梨醇 |
1.0 |
溴麝香草酚蓝 |
0.024 |
pH 7.4±0.1 25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、试验方法:
1.用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用;
2.将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液;
3.吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中,36±1℃培养24±2h后,观察试验结果。
五、结果观察与解释
接种以下质控菌株,36±1℃培养24±2h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC29544 |
+++ |
阳性,变黄 |
坂崎肠杆菌 |
ATCC29544 |
+++ |
阴性,颜色不变 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
阳性,变黄 |
大肠埃希氏O157菌 |
ATCC35150 |
+++ |
阴性,颜色不变 |
肺炎克雷伯氏菌 |
CMCC(B)46117 |
+++ |
阳性,变黄 |
宋内志贺氏菌 |
CMCC(B)51592 |
+++ |
阴性,颜色不变 |
图1-1 山梨醇生化管质控结果
图1-2 乳糖胆盐发酵培养基微生物质控结果
备注:a:鼠伤寒沙门氏菌,b:坂崎肠杆菌,c:大肠埃希氏菌,d:大肠埃希氏O157菌,e:肺炎克雷伯氏菌,f:宋内志贺氏菌,g:空白对照
六、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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