用于大肠菌群的固体平板检测,其中蛋白胨提供氮源;乳糖提供碳源;去氧胆酸钠是一种抑菌剂,主要抑制革兰氏阳性菌的生长;磷酸氢二钾是一种缓冲体系;柠檬酸铁和柠檬酸钠是一种生长促进剂;中性红是一种指示剂,在酸性时呈红色,当大肠菌群发酵乳酸时产生酸性物质,所以菌落呈红色;氯化钠是维持细菌生长时的渗透压;琼脂是一种凝固剂。
二、试验方法:
称取本品43.0g,加入1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸1分钟。冷却至45-50℃左右时,倾入无菌平皿,无需高压灭菌。使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
1、制备质控菌液。
2、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。
3、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。
4、35℃倒置培养基培养24小时,记录实验结果。
三、结果判定:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
回收率 |
其他特征 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
G≤1 |
/ |
/ |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
红色菌落 |
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
无色透明菌落 |
弗氏柠檬酸盐杆菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
红色菌落 |
阴沟肠杆菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
+++ |
≥70% |
红色菌落 |
图1-2 去氧胆酸盐琼脂微生物质控结果
备注:a:金黄色葡萄球菌,b:大肠埃希氏菌,c:伤寒沙门氏菌,d:弗氏柠檬酸盐杆菌,e:阴沟肠杆菌
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