一、用途:
用于产气荚膜梭菌的牛奶发酵试验(GB4789.13-2012)。
二、实验原理:
产气荚膜梭菌能发酵乳糖,凝固酪蛋白并大量产气,呈“暴烈发酵”现象。
三、培养基配方(g/L):
全脂牛奶 |
100.0 |
硫酸亚铁 |
1.0 |
pH /25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果。
四、试验方法:
1、称取本品101.0g, 加热溶解于 1000ml蒸馏水中,分装试管,116℃高压灭菌10分钟,备用。
2、挑取产气荚膜梭菌及大肠埃希氏菌单菌落,接种到FTG培养基,36±1℃培养18-24h。
3、取生长旺盛的FTG培养液1ml接种于含铁牛奶培养基,在46±0.5℃水浴中培养2h后,每小时观察一次有无“爆裂发酵”现象,该现象的特点是乳凝结物破碎后快速形成海绵样物质,通常会上升到培养基表面。5h内不发酵者为阴性。
五、结果观察与解释
接种以下质控菌株,在46±0.5℃培养2-5小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
++ |
不发酵 |
产气荚膜梭菌B型 |
/ |
/ |
+++ |
有暴烈发酵现象 |
产气荚膜梭菌D型 |
/ |
/ |
+++ |
有暴烈发酵现象 |
图1-2 含铁牛奶培养基微生物质控结果
备注:a:产气荚膜梭菌B型,b:产气荚膜梭菌D型,c:大肠埃希氏菌,d:空白对照
六、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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