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    动力-硝酸盐培养基生化管的实验原理及方法

    杨永帅
    录入时间:2019-3-8 10:21:45 来源:青岛银河澳门官网入口

    一、实验原理:

     蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、矿物质;硝酸钾被某些细菌还原为亚硝酸盐,如大肠埃希菌;有的细菌则可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵;有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮,如假单胞菌等。硝酸盐还原试验是测定还原过程中所产生的亚硝酸。亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸,后者与α-萘胺结合生成N-α萘胺偶苯磺酸。做此试验时,应以一支未接种细菌的培养基做对照试验,只有对照管阴性时,才能判定。结果判定:出现红色为阳性反应。如欲检查培养基中硝酸盐是否被分解,可取锌粉少许加入培养基内,如出现红色表明硝酸盐仍存在;若不出现红色,表示硝酸盐已被分解。较少量的琼脂作为培养基的凝固剂。

    二、试验方法:

     取新鲜质控菌株斜面,用接种针挑取菌苔穿刺接种至生化管中,36±1℃培养24h后,观察结果,再按顺序滴加硝酸盐还原试剂,观察实验结果。

    三、结果判定:

     接种以下质控菌株,36±1℃需氧培养24小时:

    质控菌株

    菌株编号

    生长情况

    其他特征

    大肠埃希氏菌

    ATCC25922

    良好

    扩散生长,加硝酸盐还原试剂甲乙液各两滴变红色

    蜡样芽胞杆菌

    ATCC11778

    良好

    扩散生长,加硝酸盐还原试剂甲乙液各两滴变红色

    产气荚膜梭菌

    ATCC13124

    良好

    无动力,加硝酸盐还原试剂甲乙液各两滴变红色

    单增李斯特氏菌

    ATCC19114

    良好

    扩散生长,加硝酸盐还原试剂甲乙液各两滴不变色


    图1-1  动力-硝酸盐培养基微生物质控结果

    备注:a:大肠埃希氏菌,b: 蜡样芽胞杆菌,c: 产气荚膜梭菌,d:单增李斯特氏菌,e:空白对照


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