一、试验原理:
用于食品中芽孢杆菌的鉴定和计数(APHA方法)。
蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;葡萄糖是可发酵糖类;溴甲酚紫是指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。
操作步骤灭菌后,25℃时,该培养基pH值应为6.8±0.2。
二、培养基配方(g/L):
酪蛋白胨 |
10.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
溴甲酚紫 |
0.04 |
琼脂 |
12.0 |
pH(25℃) |
6.8±0.2 |
三、试验方法:
粉体装培养基的使用:
1.称取本品27.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。
2.必须满足的试验条件:25℃时,pH值为6.8±0.2
3. 制备质控菌液,选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。
4. 36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,36±1℃倒置培养基培养18-24小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
枯草芽孢杆菌 |
CMCC(B)63501 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
不规则菌落 |
蜡样芽孢杆菌 |
ATCC11778 |
20-200 |
PR≥0.7 |
不规则菌落 |
图1-1 葡萄糖酪胨琼脂微生物质控结果
备注:a:枯草芽孢杆菌,b: 蜡样芽孢杆菌,c: 空白对照
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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