一、试验原理：
用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌。
蛋白胨和水解酪蛋白提供氮源和微量元素；乳糖是可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压，去氧胆酸钠和三号胆盐抑制革兰氏阳性菌；丙酮酸钠刺激目标菌的生长；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
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蛋白胨 |
15.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
草酸钠 |
2.0 |
|
去氧胆酸钠 |
6.0 |
|
三号胆盐 |
5.0 |
|
丙酮酸钠 |
2.0 |
|
孟加拉红 |
0.04 |
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水解酪蛋白 |
5.0 |
|
琼脂 |
17.0 |
|
pH（25℃） |
pH 7.4±0.1 |
三、试验方法：
粉体装培养基的使用：
1.称取本品67.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟。冷却至50℃左右时，倾入无菌平皿。
2.使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。
3.制备质控菌液。
4.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。
5. 用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。
6. 26±1℃倒置培养基培养48±2小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，26±1℃倒置培养基培养48±2小时：
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
质控评定标准 |
结果 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
G≤1 |
/ |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
- |
粉红色菌落 |
|
小肠结肠炎耶尔森氏菌 |
CMCC(B)52204 |
20-200 |
PR≥0.5 |
粉红色中心，不粘稠性菌落 |
图1-2 改良Y培养基微生物质控结果
备注：a:小肠结肠炎耶尔森氏菌，b:大肠埃希氏菌，c:金黄色葡萄球菌
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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