一、试验原理：
用于粪链球菌的选择型分离培养及计数.
䏡蛋白胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；麦芽糖和乳糖为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；叠氮钠可抑制革兰氏阴性菌；琼脂是培养基的凝固剂；溴甲酚紫为指示剂染料；粪链球菌能将TTC（氯化三苯基四氮唑）还原成一种酸性的偶氮染料，显示为深红色菌落。
二、培养基配方（g/L）：
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月示蛋白胨 |
10.0 |
|
酵母粉 |
10.0 |
|
甘油磷酸钠 |
10.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
麦芽糖 |
20.0 |
|
乳糖 |
1.0 |
|
叠氮钠 |
0.4 |
|
琼脂 |
13.0 |
|
溴甲酚紫 |
0.015 |
|
pH 7.2±0.2 |
25℃ |
三、试验方法：
粉体装培养基的使用：
1.称取本品69.4g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸至完全溶解，冷却至50-60℃时，加入无菌1%TTC溶液10ml，混匀，倾入无菌平皿，备用.。
2.使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。
3.制备质控菌液。
4.培养基冷却至46±1℃左右时，倾入含1ml质控菌液的无菌平皿中，约15ml培养基，混匀，凝固。
5.36±1℃倒置培养基培养48±2小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，36±1℃倒置培养基培养48±2小时：
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
质控评定标准 |
结果 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
G≤1 |
/ |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
G≤1 |
/ |
|
肠球菌 |
/ |
20-200 |
PR≥0.7 |
红色菌落 |
|
粪肠球菌 |
ATCc29212 |
20-200 |
PR≥0.7 |
红色菌落 |
图1-2 KF链球菌琼脂质控结果
备注：a:金黄色葡萄球菌，b:大肠埃希氏菌，c:肠球菌，d：粪肠球菌
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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