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TSC琼脂原理和使用方法

张辉
录入时间:2019-1-4 13:51:53 来源:青岛银河澳门官网入口

一、试验原理:

  胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂培养基(TSC)用于产气荚膜梭菌的平板计数。胰胨、大豆胨和酵母浸粉作为培养基中的基础营养物质,提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子;的产生,产气荚膜梭菌能利用焦亚硫酸钠中的S产生硫化氢气体,与柠檬酸铁铵中的亚铁离子反应生成黑色的硫化亚铁物质;D-环丝氨酸能抑制革兰氏阴性菌和其他非梭菌细菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方(g/L):

  胰胨

  大豆胨

  酵母浸粉

  柠檬酸铁铵

  焦亚硫酸钠

  琼脂

  pH值7.6±0.2(25℃)

15.0

5.0

5.0

1.0

1.0

15.0


三、试验方法:

  1)称取本品47.0g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃时,每250mL培养基加入过滤除菌的0.5% D-环丝氨酸溶液20mL,混匀,备用。

  2)采用滤膜法,取50mL的水样用孔径为0.45μm的滤膜过滤,然后将滤膜移至TSC琼脂培养基上,倒置于36℃±1℃厌氧培养24h,计数黑色菌落。

四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养22-24小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

方法

质控结果

其他特征

产气荚膜梭菌

ATCC 13124

20-200

定量

PR≥0.7

黑色菌落

艰难梭菌

ATCC 43593

/

半定量

G≤1

/

 


产气荚膜梭菌ATCC13124



 

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