一、实验原理：
用于沙门氏菌的选择性分离培养
月示蛋白胨、牛肉膏提供碳源、氮源、维生素和矿物质；乳糖、蔗糖为可发酵的糖类；十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌；氯化钠维持均衡的渗透压；硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂；溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂，发酵糖产酸的菌落呈橙黄色，不发酵糖的菌落为蓝绿色。
二、培养基配方（g/L）：
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月示蛋白胨 |
12.0 |
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牛肉膏 |
3.0 |
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氯化钠 |
5.0 |
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乳糖 |
12.0 |
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蔗糖 |
12.0 |
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十二烷基硫酸钠 |
2.0 |
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酸性复红 |
0.1 |
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溴麝香草酚蓝 |
0.064 |
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硫代硫酸钠 |
6.8 |
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柠檬酸铁铵 |
0.8 |
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琼脂 |
12.0 |
三、操作步骤
使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。
1、制备质控菌液。
2、目标菌选择合适稀释度的质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。
3、非目标菌用1μL接种环取质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。
4、36±1℃倒置培养基培养18-24小时，记录实验结果。
接种以下质控菌株，在36±1℃需氧培养18-24小时：
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质控菌株 |
菌株编号 |
其他特征 |
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鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
蓝绿色菌落有黑色中心 |
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肠炎沙门氏菌 |
CMCC(B)50760 |
蓝绿色菌落有黑色中心 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
黄色菌落有胆盐沉淀环 |
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金黄色葡萄球菌 |
ATCC6238 |
抑制 |
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普通变形杆菌 |
ATCC13355 |
黄色菌落有黑色中心 |
图1-2 WS琼脂微生物质控结果
备注：a: 肠炎沙门氏菌，b:鼠伤寒沙门氏菌，c: 大肠埃希氏菌，d；普通变形杆菌，e金黄色葡萄球菌
方法的局限性
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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