一、试验原理:
本培养基主要用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌的计数。
蛋白胨、牛肉粉、酵母粉和葡萄糖在培养基中作为基础营养物质提供碳源、氮源和其他的生长因子满足细菌生长的需求;吐温80、醋酸钠、磷酸盐、柠檬酸三铵、镁盐和锰盐提供培养多种乳酸菌所需的生长因子,同时可能抑制除乳酸菌外其他菌的生长;琼脂在培养基中起凝固的作用。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
酵母浸粉 |
4.0 |
葡萄糖 |
20.0 |
吐温80 |
1.0ml |
K2HPO4·7H2O |
2.0 |
醋酸钠·3H2O |
5.0 |
柠檬酸三铵 |
2.0 |
MgSO4·7H2O |
0.2 |
MnSO4·4H2O |
0.05 |
琼脂 |
15.0 |
pH 6.2±0.2 25℃ |
三、试验方法:
称取本品66.2g,溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,当培养基冷至50℃时,倾入无菌平皿,在24小时内使用。注意保持培养基表面干燥。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养48±2小时。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
婴儿双歧杆菌 (厌氧培养) |
CICC6069 |
20-200 |
+++ |
圆形,边缘整齐,瓷白色 |
嗜酸乳杆菌 |
CICC6005 |
20-200 |
+++ |
圆形,中等大小,边缘整齐,瓷白色 |
植物乳杆菌 |
ATCC8014 |
20-200 |
+++ |
圆形,中等大小,边缘整齐,瓷白色 |
图1-MRS培养基质控结果
备注:a:婴儿双歧杆菌,b:嗜酸乳杆菌,c: 植物乳杆菌
五、方法的局限性
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其它补充实验。
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