一、培养基原理及用途
此培养基常用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养,在2015版中国药典中用于耐胆盐革兰氏阴性菌的选择性增菌培养和检测。
培养基中的明胶胰酶水解物提供基本营养,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂,维持培养基PH的相对稳定,牛胆盐和亮绿为选择性抑菌剂,可抑制大多数非肠道细菌和革兰氏阳性菌的生长,葡萄糖可为细菌提供能源利用。
多数肠道菌对胆盐和亮绿有较强的耐受性,可在此培养基中生长,部分细菌可分解葡萄糖大量产酸,亮绿在酸性条件下变成黄色至无色;一些细菌还可分解葡萄糖产气,在培养基上方产生大量气泡;而不发酵葡萄糖或发酵葡萄糖产酸较弱的细菌生长后,培养基仍为绿色;革兰氏阳性菌和多数非肠道菌群受胆盐和亮绿的抑制,在此培养基中不生长或生长差。
二、成分(g/L)
明胶胰酶水解物..........10.0
二水合磷酸氢二钠......8.0
牛胆盐.........................20.0
亮绿.............................0.015
葡萄糖.........................5.0
磷酸二氢钾.................2.0
PH:7.2±0.2
三、质控方法及实验现象
接种10-100CFU的大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌,100-1000CFU的金黄色葡萄球菌,置于30-35℃培养24-48h。
a:大肠埃希氏菌;b:铜绿假单胞菌;c:金黄色葡萄球菌;d:空白
说明:大肠埃希氏菌可在此培养基中生长,并发酵葡萄糖产酸产气,因此培养基浑浊变黄,顶部有气泡产生;铜绿假单胞菌为需氧菌,且发酵葡萄糖产酸能力较若,因此在培养基上方生长旺盛并形成菌膜,无气泡产生,培养基仍为绿色;金黄色葡萄球菌受到胆盐和亮绿的强抑制性,在此培养基中不生长。
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