一、试验原理：
胰酪蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质；葡萄糖提供碳源；氯化钠维持均衡的渗透压；溴麝香草酚兰做指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。本培养基用于鉴别革兰氏阴性细菌对于葡萄糖的发酵型和氧化型代谢作用。将同一菌株接种于2支培养基中，其中一支管的培养基上加石蜡等灭菌矿物油脂来隔离氧气，另一支管不加。这样发酵型细菌在两管培养基中均产生酸性反应，氧化型细菌则在未加油脂的管中产生酸性反应，而在加油脂的培养管中只有轻度或者没有反应变化。
二、培养基配方（g/L）
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胰酪蛋白胨 |
2.0 |
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磷酸氢二钾 |
0.3 |
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氯化钠 |
5.0 |
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葡萄糖 |
10.0 |
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溴麝香草酚兰 |
0.08 |
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琼脂 |
2.0 |
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pH 7.2±0.1 25℃ |
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此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
三、 实验方法：
取本品19.5g加1L蒸馏水，加热溶解，分装试管，每管3ml，116℃高压灭菌15min。
1．用接种针挑取纯培养物，同时穿刺接种两管培养基。
2．一管接种后添加灭菌液体石蜡于培养基表面，厚度于5mm，称封闭管，另一管不加，称开放管。
3． 36±1℃需氧培养24-48小时，记录实验结果。
四、试验结果判断：
各种菌对O-F培养基呈三种形式：
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质控菌株 |
菌株编号 |
代谢类型 |
开放管 |
封闭管 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
发酵 |
酸（黄） |
酸（黄） |
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铜绿假单胞菌 |
ATCC27853 |
氧化 |
酸（黄） |
碱（绿） |
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粪产碱杆菌 |
CMCC40001 |
不分解糖 |
碱（绿） |
碱（绿） |
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