用途:用于菌落总数测定(GB/T4789.9-2003和GB/T4789.28-2003)。
原理:蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;大多数细菌能还原TTC,使之形成易于辨别的红色菌落,TTC还能减缓某些细菌的蔓延生长。
操作步骤:
使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
1、制备质控菌液。
2、选择合适稀释度的目标菌质控菌液1ml,接种到两个无菌平皿中,将10ml-15ml冷至45-50℃的TTC营养琼脂倾注于每个平皿中。小心旋转平皿,将培养基和目标菌质控菌液充分混匀。待琼脂凝固后,再加入3ml-4ml的TTC营养琼脂覆盖平板表层,以TSA为参比培养基。
3、36±1℃倒置培养基培养48±2小时,记录实验结果。
微生物试验:
接种以下质控菌株,36±1℃倒置培养基培养48±2小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数 培养基 |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
淡红色菌落 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
PR≥0.7 |
淡红色菌落 |
||
伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
PR≥0.7 |
淡红色菌落 |
||
铜绿假单胞菌 |
CMCC27853 |
20-200 |
PR≥0.7 |
淡红色菌落 |
图1-2 TTC营养琼脂微生物质控结果
备注:a:金黄色葡萄球菌,b:大肠埃希氏菌,c:伤寒沙门氏菌,d: 铜绿假单胞菌
方法的局限性
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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