一、试验原理:
赖氨酸铁琼脂培养基中,蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;溴甲酚紫为pH指示剂;琼脂作为凝固剂。
培养基用于同时检测肠杆菌科细菌的赖氨酸脱羧酶和产硫化氢试验,特别用于检测沙门氏菌和亚利桑那菌。
二、培养基
蛋白胨 | 5.0 g |
酵母浸膏 | 3.0 g |
葡萄糖 | 1.0 g |
盐酸L-赖氨酸 | 10.0 g |
硫代硫酸钠 | 0.04 g |
柠檬酸铁铵 | 0.5 g |
溴甲酚紫 | 0.02 g |
琼脂 | 15.0 g |
水 | 1000.0 mL |
将以上各成分(溴甲酚紫除外)加热溶化于水中,调至pH 6.7 ± 0.2,加入溴甲酚紫,混合均匀,分装于100*13mm小试管中,每管4mL,116℃灭菌15min,制成深底层短斜面(斜面长2.5cm,底部长4cm),凝固备用。本培养基可再添加精氨酸10.0 g,即制成赖氨酸精氨酸铁琼脂斜面,用于耶尔森氏菌的鉴别。
三、试验方法
以接种针挑取纯培养物或菌落穿刺接种达管底,并涂划于斜面,于36±1℃培养18-24h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
质控结果 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
+++ |
斜面紫色,底层紫色,产硫化氢 |
亚利桑那沙门氏菌 |
CMCC(B) 47001 |
+++ |
斜面紫色,底层紫色,产硫化氢 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
+++ |
斜面紫色,底层紫色,不产硫化氢 |
五、说明:
若与三糖铁琼脂培养基联合使用,在初步生化鉴定中会有很大助益。
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