快速硫化氢试验琼脂是国标中提及的一种应用于空肠弯曲菌的快速硫化氢实验的琼脂培养基,由于其方便高效、结果清晰,因此应用率极高。下面我们来介绍一下的它的作用原理及操作注意事项。
作用原理:
有些细菌可以分解本培养基中含硫氨基酸或含硫化合物(如蛋白胨等),而产生的硫化氢气体。硫化氢遇铁盐可以生成黑色沉淀,因此快速硫化氢实验便是以此作为判断依据,由于空肠弯曲菌不能够产生硫化氢,因此用在快速硫化氢试验琼脂培养后无黑色产生。
操作方法:
准备菌株——穿刺——37℃微需氧环境培养1-2天
注意事项:
1、快速硫化氢试验一般用鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌作对照。其中鼠伤寒沙门氏菌穿刺结果为阳性,即沿穿刺线显示黑色;大肠杆菌试验结果为阴性,即不显示黑色。
2、由于快速硫化氢试验琼脂中的琼脂含量较低,因此培养基呈半固体状态,配置半固体时需要额外注意在琼脂凝固前禁止摇晃,否则凝固以后会呈糊糊状。此外,据国标所述,穿刺时应沿壁穿刺且接种至培养基的2/3的深度。
3、快速硫化氢试验琼脂在配制时需要注意其中的铁盐、丙酮酸钠均需现配现用,由于培养基中铁盐的存在,因此制成的培养基底部会有少量的沉淀。
4、空肠弯曲菌生长条件要求特殊,需在微氧环境中生长,因此在菌株准备和快速硫化氢试验培养中应该用厌氧培养袋,并在袋中加入微需氧培养袋。空肠弯曲菌菌株准备时建议用血平板,以保证其能够较好生长。
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