一、实验原理:
各种细菌所含有的分解糖(苷、醇)的酶类不同,对糖(苷、醇)的分解能力各有差异。对某一种糖有的细菌不分解,有的分解后仅产酸,有的分解后既产酸又产气,据此可用以鉴别细菌。
二、试剂与器材:
1、菌种:大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌。
2、培养基:葡萄糖和乳糖发酵管。
三、操作步骤:
将大肠埃希氏菌和伤寒沙门氏菌分别接种于葡萄糖、乳糖发酵管内,35℃培养18h~24h观察结果。
四、试验结果:
观察结果时,首先确定细菌是否生长,若细菌生长则培养基浑浊,然后再观察细菌对糖类分解的结果:
(1)不分解糖:培养基颜色与接种前相比无变化,记录时以“-”表示;
(2)分解糖只产酸不产气:培养基中的指示剂(溴甲酚紫)由紫色变为黄色,液体培养基中的倒管未发现气泡;若为半固体培养基,则培养基内未见气泡或琼脂断裂,记录时以“+”表示;
(3)分解糖既产酸又产气:除培养基中的指示剂颜色改变外,液体培养基中的倒管见有气泡;若为半固体培养基,则培养基内出现气泡或琼脂断裂,记录时以“”表示。
本试验大肠埃希氏菌分解葡萄糖和乳糖产酸又产气“”,伤寒沙门氏菌分解葡萄糖只产酸不产气“+”,不分解乳糖“-”。
五、注意事项:
配制糖发酵管时内装的小倒管在接种细菌前应是无气泡存在的,否则不宜接种细菌。
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