1、严格按照实验标准控制每个平皿中培养基的量，因为如果培养基的量过多使得培养基过于厚，那么当四连式牛津杯放置上之后会被平皿盖压住，导致牛津杯中的抗生素不易渗出。
2、平皿内培养基一定要平，一旦不平则放置的四连式牛津杯会无法全部接触培养基导致漏液。
3、添加菌层时一定要注意控制培养基温度和添加的速度，因为菌层的培养基量很少，一旦掌握不好，则容易在菌层盖满整个平皿之前凝固无法使用四连式牛津杯。
4、菌层铺满后要让培养基充分冷却，若培养基没有完全冷却，放置四连式牛津杯后，牛津杯会被压入培养基内使得抗生素无法渗出。
5、放置好四连式牛津杯之后，放置压杯板，时间要控制在五秒左右，太长则容易让四连式牛津杯嵌入菌层内，时间太短则接触不够紧密，会漏液。
6、培养时尽量把平板平铺在培养箱内，尽量不要将平皿摞起来，因为上面的平皿可能将下面的牛津杯压进培养基内。
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