一、实验原理:
培养基为含尿素、蛋白胨成分的半固体培养基,指示剂为酚红。具有色氨酸酶的细菌能分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚,加入吲哚试剂后,培养基与吲哚试剂的界面会变红;具有尿素酶的细菌能分解尿素产生氨,使整个培养基变碱呈红色;有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。
二、试剂与器材:
1.菌种大肠埃希氏菌、普通变形杆菌。
2.培养基MIU培养基等。
3.试剂吲哚(靛基质)试剂。
三、操作步骤:
将大肠埃希氏菌和普通变形杆菌穿刺接种于MIU培养基,35℃培养18h~24h,观察动力和尿素酶反应后,再滴加吲哚试剂。
四、试验结果:
大肠埃希氏菌动力阳性,吲哚阳性,尿素酶阴性;普通变形杆菌动力阳性,吲哚阳性,尿素酶阳性。
五、注意事项:
滴加吲哚试剂需沿管壁徐徐滴入,稍待片刻即观察培养基与吲哚试剂的界面是否出现红色化合物,随着时间的推移,红色化合物会扩散以至不清晰。
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