品红亚硫酸钠琼脂培养基的工作原理：
乳糖发酵的细菌产生乙醛，在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落，快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽，不发酵乳糖的细菌形成无色透明的菌落。品红亚硫酸钠琼脂培养基中的蛋白胨、酵母粉、牛肉粉可提供碳氮源、维生素和矿物质；乳糖为可发酵的糖类；琼脂是培养基的凝固剂；磷酸氢二钾为缓冲剂；亚硫酸钠能将碱性品红还原，使其褪色，发酵乳糖的细菌产生乙醛，与亚硫酸钠和碱性品红生成红色菌落。
品红亚硫酸钠琼脂培养基配制及使用时的一些注意事项：
（1）碱性品红是一种碱性染料，微溶于水，在水中的溶解度为1%，能溶于乙醇，在无水乙醇中的溶解度为8%，因此在配制培养基时应先用无水乙醇将碱性品红充分溶解后再加入。
（2）碱性品红的颜色来源于它的大共轭体系，亚硫酸盐能破坏品红的大共轭体系使品红褪色，加热能否恢复成红色就看其共轭结构能否恢复，因此我们会看到品红亚硫酸钠培养基在灭菌前是淡红色的，灭菌后温度高时为红色，待冷却后红色会褪色。倒好的平板放置时间过长可能会使红色加深，因此要及时使用。
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