1.被保存的菌种必须是经18小时以上培养时间的新鲜纯培养物。
2.菌种的保存最好使用配制3-4麦氏比浊度的菌悬液，若浓度过低会影响复苏效果。
3.菌种保存时要上下颠倒，使细菌乳化、混匀，充分的吸附在小瓷珠上，不可旋摇，这样不利于菌悬液混匀。
4.用无菌移液器将菌种保存管内的液体吸取干净，妥善放置吸出液体。
5.有条件的话可放在-70℃保存，若在-2—-8℃保存要一个月重新传代一次以保证菌种有无变异性，连续传代5次的菌种不能使用。
6.不要将菌株反复冻存，低温会使水分形成冰晶导致细菌的损伤，反复冻存冰晶会变大，对菌株造成极大的损伤。
7.做厌氧菌保存时应提供厌氧环境，使用厌氧包、厌氧箱等。
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