一、目的
目的是确定各种重要表面存在的活体微生物，包括层流工作台，实验设备（集菌仪），实验室人员。
二、方法：接触碟法、擦拭法
1、接触碟法：是将充满规定的琼脂培养基的接触碟对规则表面或平面进行取样，然后至合适的温度下培养一定时间并计数。
适用范围：实验人员及实验台面等
接触碟：直径55cm
取样面积：约为25cm2
结果报告：CFU/碟
培养基：种类、培养条件、培养基质量同沉降菌监测
自制接触碟
与之接触碟（商品化）
三层严密包装，内层真空封装
高压灭菌+钴60辐射灭菌，确保产品无菌
培养基应具有极强的弹性、持水性，不会出现渗水现象。
2-8摄氏度保存，一般保质期半年
可根据客户需求在培养基中添加青霉素酶等催化酶，用于去除生产中产生的抗生素粉尘的抗菌性。
监测步骤：
1）从冷藏柜中取出接触皿，并恢复至室温。
2）将包装整体送入取样地点，在此过程中逐步去掉外面两层包装，最后一层真空包装在操作间打开。
3）打开接触皿上盖，使培养基充分接触待测表面，必要使用手指轻轻按压接触皿外侧底部中心约10秒，轻轻抬起，将上盖从接触皿一侧小心盖上。
4）在接触皿磨砂区域标记取样地点、取样时间和取样人。
5）取样后的清理：用消毒剂或杀孢子剂擦拭测试区域，以消除培养基的残留。
6）将接触皿从洁净室取出，按规定的温度和时间倒置培养。
7）观察、计数
注意：
1）表面微生物检测要在实验结束后进行。
2）消毒剂残留物对监测的影响
测试表面接触时，接触皿往往会接触清洗或消毒洁净室的消毒剂残留物。数百种不同的杀菌剂用于世界各地的制药设施，事实上许多监管机构希望看到轮流使用不同消毒原理的两种消毒剂，这些不同的消毒物质会抑制接触板上污染物的生长。
为抵制这些消毒剂的生长抑制性质，中和剂被添加到培养基中。卵磷脂，聚山梨醇酯80，组氨酸和硫代硫酸钠的适当组合被认定能中和高达80%的常用消毒剂。
3）方法验证的问题
环境中分离的代表菌；代表性试验表明；回收率
4）取样部位
头部、口罩、肩部、前胸、前臂、手腕、腿部/靴子、眼罩
5）限度的理解：A级＜1cfu/碟
举例：监测了4个部位（人员）（左上臂接近手腕处，右上臂接近手腕处、前胸、口罩外表面）
不合格结果：4个接触碟平均菌落数≥1cfu
2、擦拭法：采用合适尺寸的无菌模板或标尺确定擦拭的面积，无菌拭子取样后，拭子置合适的缓冲液或培养基中，充分振荡，再用适应的方法计数。是接触碟法的补充。
浸湿液：通常为无菌生理盐水或0.1%的蛋白胨溶液约5毫升
培养基：TSA
计数法：平皿涂布法、平皿浇注法、薄膜过滤贴膜法
拭子头：材料类型包括聚酯、聚氨酯、尼龙和棉
棉签头：需要灵活、耐足够长的时间，达到难以达到的地点，如管道内部。
操作：
1、浸湿拭子：开启装有约为5ml的无菌浸湿液的小试管（到带有螺旋帽的），将拭子头部浸湿，紧贴管内壁转动，挤压出多余的溶液。
2、擦拭表面：拿住拭子柄与待测物表面成30度角，缓慢并全部涂抹待测物表面三次，没涂抹一次注意翻转拭子头的方向。
3、涂抹后折断拭子头放入浸湿液试管中盖上帽，充分振荡带拭子的试管10秒，取出1ml混悬液接种到灭菌平皿中。
4、浇注灭菌TSA培养基 ，培养，计数。
注意：
1）表面微生物检测要在试验结束后进行
2）消毒剂残留物对监测的影响
3）取样位置
4）取样方式
5）方法验证问题
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