培养基和试剂

1、营养琼脂培养基

2、10%（m/m）硫代硫酸钠（Na2S2O3）溶液，一般情况下125ml的采样瓶加0.1ml，加完后121℃高压灭菌20min。

操作步骤

1、采样瓶的要求和预处理：用于微生物分析的采样要无酸、无碱、无毒的玻璃容器，采样瓶在灭菌前加入足量的10%（m/m）硫代硫酸钠（Na2S2O3）溶液，一般情况下125ml的采样瓶加0.1ml，加完后121℃高压灭菌20min。

2、用灭菌吸管吸取均匀水样1ml，注入到灭菌平皿内，另取1ml注入另一灭菌平皿内作平行接种，取1ml加到9ml无菌生理盐水中，作1:10稀释，混匀后取2ml分别加到两个无菌平皿内，每皿1ml。

3、将熔化并冷却至45℃的营养琼脂培养基倾注平皿内，每皿约15ml，领取一个不加样品的平皿作空白对照，立即旋摇平皿，使水样和培养充分混匀，待琼脂凝固后翻转平皿，置36℃±1℃恒温箱内培养48h。

菌落计数方法

  先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5~10倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌落数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数，若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，菌落计数后乘以2，所得结果代表全皿菌落数。

上一篇：游泳池水微生物检验标准-大肠菌群测定

下一篇：生化检验中的各种空白概念