标准:菌落总数(cfu/cm2):≤30 大肠菌群:(MPN/100cm2)<3
1 采样时间: 在消毒后,使用前进行采样。
2 采样方法(滤纸浸贴法)
将5cm×5cm(25cm2)灭菌滤纸片使用前用无菌生理盐水浸湿均匀,使用无菌镊子夹住贴在食品接触面表面(如模具、传送带、手等表面),充分接触停留1分钟,反转背面同法操作停留1分钟,立即投入盛有50mL的灭菌盐水三角瓶中,充分振摇后,制成原液。
3 检测方法:按GB4789.1-4789.3执行
3.1菌落总数的检测
用无菌吸管取1.0mL原液接种于灭菌平皿内,平行接种两个平皿,加入灭菌冷却至约46℃的营养琼脂约15mL,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,反转平皿置于37℃恒温箱培养48小时,计数菌落数,用cfu/cm2表示。
菌落总数(cfu/cm2)=平板上菌落平均数×稀释倍数
3.2大肠菌群的检测
3.2.1方法:用无菌吸管取3个10mL原液分别接种于3个含10mL双倍乳糖胆盐发酵培养基管内(管内均装有3.5cm长的小倒管);用无菌吸管取3个1mL原液,分别接种在3个含10mL单料乳糖胆盐发酵培养基管内;将原液1:10稀释后,取3个1mL,分别接种在3支含10mL单料乳糖胆盐发酵培养基管内。共9支发酵培养管,置于37℃恒温箱培养24小时。若所有乳糖胆盐发酵管均不产酸、产气,则可报告大肠菌群阴性。若乳糖胆盐发酵管变黄且产气,要进行分离培养。取一接种环划种伊红美蓝琼脂平板,37℃培养24小时,挑取典型菌落,涂片进行革兰氏染色。同时接种乳糖复发酵管,置37℃培养24小时,观察产气情况。凡乳糖复发酵管产气、革兰染色为阴性的无芽孢杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
3.2.2结果报告:根据大肠菌群阳性管数,查大肠菌群最可能数(MPN)检索表,降低十倍报告,用MPN/100cm2表示(见GB4789.3-2003)。
4注意事项
4.1若污染不严重,大肠菌群检验可仅做三管原液检验,报告大肠菌群的MPN值即可。
4.2若测定菌落总数接种于平皿内的是原液,因稀释倍数为1,则直接报告菌落总数的平均值。
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