目标
-通过对O157:H7检验常规法、免疫磁珠捕获方法、VIDAS、BAX方法的配对比较,对方法进行有效的评价,考察4种方法间是否存在差异,同时判断VIDAS、BAX方法的可行性。
实验设计
-样品的选择:生猪肉陷、生菜。
-样品的染菌:将样品充分混匀,称取25g样品,加入O157:H7标准菌株(ATCC43888)生理盐水菌悬液,染菌样品的各种浓度见表1。
-实验操作:详见标准协作组下发的SOP。
-结果判断:常规法与免疫磁珠捕获方法、VIDAS、BAX方法的配对比较检验,用统计学的方法Chi-square Test(X2检验)进行分析;仪器法与磁珠法进行两两配对检验,经χ2检验进行分析。仪器法与磁株法比较,假阳性率≤10%、假阴性率≤2%为可接受方法。
结果
表5 常规法与免疫磁珠捕获方法、VIDAS、BAX方法的比较
从表5可以看出,常规法与免疫磁珠捕获方法、VIDAS、BAX方法在染菌浓度5 cfu/g时,P值均大于0.05,无显著性差异;染菌量在0.5 cfu/g的P值均小于0.05,表明常规法与免疫磁珠捕获方法、VIDAS、BAX方法之间有显著性差异;自然样品,常规法与免疫磁珠捕获方法、BAX方法比较,结果无显著性差异(P>0.05),与VIDAS方法结果有显著性差异(P<0.05);总体P值分别为0.049、0.0004、0.0023,均小于0.05,表明常规法与免疫磁珠捕获方法、VIDAS、BAX方法之间有显著性差异。
表6 磁珠法和VIDAS法检出率比较
表7 免疫磁珠捕获方法和BAX方法检出检出率比较
实验结论
免疫磁珠捕获方法和VIDAS、BAX两两配对检验分析, VIDAS方法和免疫磁珠捕获方法结果无显著性差异(P>0.05),VIDAS方法的假阳性率为7.8%,无假阴性;BAX方法和免疫磁珠捕获方法结果无显著性差异(P>0.05),BAX方法的假阳性率为3.3%,无假阴性。故可以吸收这两种仪器筛选方法作为国标检验方法。
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