沙门氏菌是一群形态、培养、生化反应和抗原构造相类似的革兰氏阴性杆菌,种类繁多。已发现2000多个种(或血型)。它是革兰氏阴性杆菌,需氧或兼性厌氧,最适生长温度为35~37℃,最适pH值为6.8~7.8。不分解乳糖(亚利桑那菌除外)。分解葡萄糖产酸产气(伤寒沙门氏菌产酸不产气)。多数产生H2S,不产生靛基质,不液化明胶,不分解尿素,不产生乙酰甲基甲醇,多数能利用枸橼酸盐,能还原硝酸盐为亚硝酸盐,在氰化钾培养基上不生长。
三糖铁试验
实验步骤:将被检菌穿刺接种三糖铁琼脂,36±1℃培养18h~24h后,观察结果。
沙门氏菌反应为:斜面产碱,底层产酸,产H2S。
反应原理:沙门氏菌不发酵乳糖,使斜面呈红色,发酵葡萄糖,而使底层呈黄色,且能分解培养基中的硫氨基酸,生成H2S,H2S遇铅或铁离子形成黑色的硫化铅或硫化铁沉淀物。
尿素酶试验
实验步骤:将被检菌接种到尿素酶肉汤中,于36±1℃培养18-24h,观察结果。变红色为阳性,不变色或者变黄色为阴性。
沙门氏菌为阴性。
反应原理:细菌能产生尿素酶,分解尿素形成氨,使培养基变碱,酚红指示剂随之变红色。
靛基质(吲哚)试验
实验步骤:将被检菌接种到蛋白胨水培养基中,36±1℃培养18h~24h后,沿试管壁滴加数滴吲哚试剂于培养物液面,观察结果。
沙门氏菌为阴性。
反应原理:细菌具有色氨酸酶,能分解培养基中的色氨酸,生成吲哚,吲哚与试剂对二甲氨基苯甲醛作用,形成玫瑰吲哚而呈红色。
ONPG试验
实验步骤:将被检菌接种于ONPG生化管肉汤中,于36±1℃培养18-24h,观察结果。溶液变黄色为阳性,不变色为阴性。
沙门氏菌ONPG试验为阴性。
反应原理:沙门氏菌具有β半乳糖苷酶,可分解邻-硝基β半乳糖苷(ONPG),生成黄色的邻-硝基酚。
赖氨酸脱羧酶试验
实验步骤:将被检菌接种到赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照生化管中,于36±1℃培养18h~24h后,观察结果。赖氨酸脱羧酶肉汤和氨基酸脱羧酶对照均变黄为阴性,赖氨酸脱羧酶肉汤变紫,氨基酸脱羧酶对照变黄为阳性。
沙门氏菌为阳性。
反应原理:当细菌利用碳源丙二酸盐时,可将分解为碳酸钠,使培养基变碱性,使指示剂由绿色变为蓝色。
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