一、目的
放线菌是介丁细菌与真菌之间的一类微生物,其菌体为丝状体,伸人培养基内的为基内菌丝,也称营养菌丝,生长在培养基表面的为气生菌丝。气生菌丝的上面可分化形成孢子丝,有各种形状,如直立、波浪、螺旋等。孢子丝可进一步分化形成孢于,孢子的形状大小也不相同,是分类的重要依据。
放线菌的菌落早期和细菌菌落相似,后期形成孢子菌落呈粉状、干燥,有各种颜色,
呈同心圆放射状。
通过实验认识放线菌的菌丝及孢子丝的形态和放线菌的菌落特征。
二、材料
显微镜、载玻片、酒精灯、接种环、石炭酸复红、解剖刀、盖玻片、培养皿、高氏1号合成培养基、丰加链霉菌及菌落。
三、方法与步骤
(一)水浸片法的制作及观察
(1)取洁净载玻片,滴加无菌水一滴。
(2)用接种环挑取经过28~30℃培养4~5d的放线菌菌落少许,置于载玻片的无菌水滴内。
(3)取洁净盖玻片一块,先将盖玻片,端与液滴接触,然后将整个玻片慢慢放下避免产生气泡。置于显微镜下用高倍镜观察。
(二)印片法的制作及观察
此法的优点是不打乱孢子的排列状态。
1.取菌 取2片干净的载玻片,用解剖刀切取一个完整的放线菌菌落(带培养基切下),放在一载玻片的中央(注意菌落应正放)。然后将另一载玻片在酒精灯下微微加热后,盖在这一菌落上面,用接种环或解剖刀轻轻按压,然后小心拿下上面这块玻片(不可在菌落上移动)。
2.固定 将取下的这块玻片,通过火焰固定。
3.染色 用石炭酸复红染色30s,然后水洗,风干。
4.镜检
(三〉埋片法的制作及观察
(1)将培养基融化后倒入平板,待凝固后挑取少量放线菌孢子接人培养基上,在接种线旁倾斜插人无菌盖玻片。
(2)28〜30℃培养4〜5d后,菌丝沿玻片向上生长,待菌丝长好后,取出玻片放在一干净载玻片上,置于显微镜下观察。
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