蜡状芽孢杆菌(Baccillus cereus)食品中毒是由于食用了含有大量细菌〔通常为107个/g的食品所引起的(Goepfert等,1973)。食品中毒暴发后,对可疑食品进行流行病学调查时,不必使用选择性培养基。蜡状芽孢杆菌为需氧菌,能产生磷脂酶,可将样品的稀释液涂布在蛋黄琼脂表面进行菌落计数,革兰氏染色后,在显微镜下检查革兰氏阳性杆菌,并进行生化试验(见下文)。蜡状芽孢杆菌和昆虫的病原体苏云金芽孢杆菌非常接近,主要区别是苏云金芽抱杆菌具有质粒编码并可对昆虫致病的δ-内毒素。δ-内毒素作为对孢晶状包含体而被沉淀,能在显微镜下检测到。Damgaard等(1996)发现苏云金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌相似,多数菌株也具有细胞产毒性。Jackson等(1995)报道了从引起中毒的食品中分离出细胞产毒的苏云金芽孢杆菌的事例。因苏云金芽孢杆菌可作为农业杀虫剂,而旦能在土壤中生存,所以许多食品中都能检测到该菌。从公众健康的角度考虑,不能仅因为在显微镜下观察到对孢晶状体就将其鉴定为苏云金芽孢杆菌,还需进一步的分离。
现在已经有广枯草芽孢杆菌和地衣型芽孢杆菌等其他种类芽孢菌引起食品中毒的报道(Kramer等,1982)。
蜡状芽孢杆菌广泛存在于各种环境中,许多食品中都含有少暈的蜡状芽孢杆菌。所以不必采用选择性增菌法对菌体进行增殖。若食品中含有中等浓度的菌体,说明蜡样芽孢杆菌已经增殖,这时,食品已有潜在的危害。可以使用选择、鉴定培养基直接计数,如使用甘露醇卵黄苯酚红多黏菌素琼脂进行样品计数。ISO 7932:1993标准中使用了这种培养基。然而,菌体在MEPPA培养基上容易过度生长,这种培养基对甘露醇发酵产生的酸几乎没有缓冲作用(蜡状芽孢杆菌不能发酵甘露醇、所以,建议使用Holbrook和Anderson(1980)的多黏菌素丙酮酸盐卵黄甘露醇溴麝香草酚蓝琼脂(MEPPA)进行蜡状芽孢杆菌的平行计数:这种脱水培养基可从牛津公司购买。该培养基中含有丙酮酸盐和蛋白胨,能提高卵磷脂酶的活性和菌体的产孢能力。但遗憾的是,该培养基的缓冲能力也很弱,所以最好先对样品增菌24h后再接种平板。平板上生长的可疑蜡状芽孢杆菌菌落可用以下试验进行验证:Hugh和Leifson培养基(测试葡萄糖的厌氧异化作用),明胶水解试验,硝酸盐还原试验,Knisely水合氯醛琼脂上生长能力的测试,与甘露醇和木糖的反应试验。
用JECRA试剂盒和牛津反向被动胶乳凝集试剂盒可以检测食品中的蜡状芽孢杆菌肠毒素。
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