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低温诱导霉菌分生孢子同步生长实验



录入时间:2015-3-2 9:26:40 来源:青岛银河澳门官网入口

    原理

  使培养液中微生物的生理状态比较一致,生长发育处在同一阶段的培养方法称同步培养法。同步培养的方法很多,最常用的有选择法和诱导法两种。
(一)选择法

  选择法是通过过滤、密度梯度离心、膜吸附和直接选择等方法,从细胞群体中选择处于同一生长发育阶段的细胞来进行培养的方法。 

1、离心沉降分离法  处于不同生长阶段的细胞’其个体大小不同,通过离心就可在一定程度分开,然用同样大小的细胞进行培养便可获得同步培养。

2过滤分离法  用孔径不同的微孔滤膜可将大小不同的细胞分,刚分裂的幼龄菌体较小,能通过滤孔,其余菌体在滤膜,将滤液中的幼龄细胞进行培养,就可得到同步培养物。

3.硝酸纤维素薄膜法  先将菌液通过硝酸纤维素膜,由于细菌与滤膜带有不同电,所以细菌能吸附于膜上,翻转薄膜,用新鲜培养液滤过培养,附着于膜上的细菌分离后的子细胞由于不与薄膜直接接触,及菌体本身的重量,加之附着着培养物液的重量,便下落到收器内,短时收集的细菌接种培养,便可得到同步培养物。

选择法同步培养影响曲体代谢下获得的,因而菌体的生命活动较为正常,有其缺点,一些微生物即使个体大小相同,其发阶段也可能不完全一致,这样的微物不宜采用这种方法。
(二)诱导法

  诱导法主要是通过制环境条件如温度、养物质等来诱导同步生长。
1.温度调
  将微生物的培养温度制在亚适温度段时间,使其缓慢地进行代谢,但又不进行分裂。然将培养温度提高到最生长温度,大多数细胞就会同步分裂。
2.营养条件调整法  控制营养物的浓度或组成以达到同步生长。限制碳源或他营物,使细胞只能进行次分裂而不能继续生长,从而获得刚分裂的细胞群体,然后再转适宜的培养屮.它们便进入同步长。

  诱导法除上述两种外还有其他方法,诱导法的缺点会给细胞的正常代谢带来一些不利影响。

  材料

黑曲霉斜面菌种.麦芽汁平板4

方法与步骤

1.悬液的制备  取数环孢子放入盛有50ml无菌水的三角瓶(瓶内放玻璃珠若干)

充分,制成孢子悬液,孢子量约105个/ml。

2.用镊子取圆形无菌玻璃纸1张(与培小相似,放在麦芽汁平板上。
3
.取孢子悬0.1ml放在板上,用玻璃涂布器涂布均匀,置于冰箱(42h取出,放30温箱培养1h。同时设一对照,不经低温处理接放入30温箱培养11h。

4.  孢厂出芽率,并比较菌丝生长情况。

 

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