一、实验目的和内容
目的：巩固油镜的使用；掌握细菌形态观察的基本方法，了解细菌的基本形态。
内容：1．观察细菌的基本形态染色装片。
2．观察枯草芽孢杆菌活菌。
3．观察细菌细胞结构的染色装片。
二、实验材料和用具
溶血链球菌(Streptococcus haemolyticus )、棒杆菌(Corymebacterium)、螺菌(Spirillum)、浮游球衣菌(Sphaerotilus natans)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium )、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis )、普通变形菌(Proteus vulgaris)、丙酮丁醇梭菌(Clostridum acetotylicum)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum )等细菌的染色装片，枯草芽泡杆菌(Bacillus subis)的斜面菌种。
 香柏油、二甲苯、无菌水；
 显微镜、擦镜纸、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸水纸、小滴管。
三、操作步骤
 (一)观察细菌的基本形态
用低倍镜、高倍镜和油镜观察溶血链球菌、棒杆菌、螺菌、浮游球衣菌的染色装片，并分别在油镜下绘图。
 (二)观察细菌的细胞结构
用低倍镜、高倍镜和油镜观察巨大芽孢杆菌(示细胞壁)、巨大芽孢杆菌(示异染粒)、苏云金芽孢杆菌(示伴胞晶体)、普通变形菌(示鞭毛)、丙酮丁醇梭菌(示芽孢)、褐球固氮菌(示荚膜)等细菌的染色装片，并分别在油镜下绘图。
(三)观察枯草杆菌活菌，常用压滴法观察。 
1．将洁净无油腻的载片放于自己右边前方，在中央放一小滴无菌水。
2．将酒精灯放于自己正前方，点燃。
3．用无菌操作方法从枯草芽孢杆菌斜面中沾取少量菌体，与载片上的水滴充分混匀，把接种环上残留的菌体杀灭后，放回试管架。
4．用镊子夹一洁净的盖玻片，使其一边先接触菌液，然后将整个盖玻片慢慢放下，注意不要产生气泡。如菌液过多，可用吸水纸适当吸去一部分。
5．先用低倍镜然后转用高倍镜观察，观察时光线要适当调暗些。
四、注意事项
1．注意擦镜头时，只能用擦镜纸。
2，观察完毕，必须将镜筒上升，才能取下装片，放入另一装片后，要按使用油镜要求，重新操作，不能在油镜下直接取下和替换装片，切记！
3．无菌操作过程中，接种环灭菌后不能触及其他物品，挑菌不能过多。
五、实验报告
(一)绘图
l．给出你所观察到的几种细菌的个体形态视野图。
2．给出你所观察到的细菌细胞结构视野图，并注明各部分。
(二)试指出在制备活菌装片时，应注意什么问题?
七、问题和思考
1．用明视野显微镜观察细菌的形态时，你认为用染色装片好，还是用非染色的活体装片好，为什么?观察活体装片与染色装片，光线调节各有什么不同?
2．无菌操作过程中，可否将棉塞放在桌面上?为什么?
3试设计一个准备本实验的工作方案。
  
   

 

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