前增菌
称取25 g (mL)样品放入盛有225 mL BPW的无菌均质杯中,以8 000 r/min~10 000 r/min均质1 min~2 min,或置于盛有 225 mL BPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min~2 min。若样品为液态,不需要均质,振荡混匀。如需要,测定pH 值,用1 mol/mL无菌 NaOH或 HCl 调 pH 至 6.8±0.2。无菌操作将样品转至 500 mL 锥形瓶中,如使用均质袋,可直接进行培养,于36 ℃±1 ℃培养 8 h~18h。
如为冷冻产品,应在 45 ℃以下不超过15 min,或2 ℃~5 ℃不超过18 h解冻。
增菌
轻轻摇动培养过的样品混合物,移取 1mL,转种于 10 mL TTB 内,于42 ℃±1 ℃培养18 h~24 h。同时,另取 1 mL,转种于10 mL SC 内,于36 ℃±1 ℃培养18 h~24 h。
增菌液灵敏度测定
测定增菌液的灵敏度要用两种细菌,目标细菌就是沙门氏菌,还必须要加入干扰细菌,一般用大肠埃希氏菌。
灵敏度以接种的目标细菌的量表示,最好的灵敏度是有一个沙门氏菌就能培养出来。其灵敏度就是1 cfu(colony forming unit,菌落形成单位)。
如果不加入干扰细菌,几乎任何培养基都能够达到1 cfu。
上一篇:沙门氏菌致病性与免疫性