MMA抑制性强,菌落小、形态不典型,很难与杂菌区分
进口PALCAM 、进口OXA菌落较典型,易与杂菌区分
CHROMagar菌落较典型,易与杂菌区分,对高污染食品中的杂菌抑制性较差
染色镜检
将上述可疑纯培养物做革兰氏染色并做湿片检查; 利斯特菌为革兰氏阳性短杆菌, 大小为0.4~0.5μm×0.5~2.0μm;用生理盐水制成菌悬液, 在油镜或相差显微镜下观察, 该菌出现轻微旋转或翻滚样的运动。
该菌为革兰氏阳性无芽孢杆菌,在纯培养物中呈短小杆菌,在初龄培养物中呈球杆菌状,在老龄培养物中呈长丝的长杆菌状,有些细菌因此而变成革兰氏阴性;为需氧或兼性厌氧菌,在20~25℃培养时能形成4根鞭毛,运动活泼;在37℃培养时无鞭毛,运动消失。
初筛
在我们前期工作中发现,高污染样品在选择性琼脂平板上可疑菌落较多,为避免漏检和减少工作量,增加初筛步骤:挑取典型或可疑菌落接种在木糖、鼠李糖发酵管中,无须烧环同时TSA-YE平板上划线分离纯菌。
初筛及纯培养
自选择性琼脂平板上分别挑取5个以上典型或可疑菌落,分别接种在木糖、鼠李糖发酵管,于37℃培养24h;同时在胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA-YE)平板上划线纯化,于30℃培养24h-48h。木糖阴性为蓝色,鼠李糖阳性为黄色,在TSA-YE平板上可疑菌落为淡蓝色。
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