培养基应适合需气菌、厌气菌或真菌的生长,可按以下处方制备,亦可使用按该处
方生产的符合规定的脱水培养基。以下培养基制备时,均以115℃灭菌30分钟。
1.需气菌、厌气菌培养基(硫乙醇酸盐流体培养基)
酪胨(胰酶水解) 15g 氯化钠 2.5g
葡萄糖 5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0ml
L-胱氨酸 0.5g (或新配制的0.2%亚甲蓝溶液0.5ml)
硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.5~0.7g
(或硫乙醇酸0.3ml) 水 1000ml
酵母浸出粉 5g
除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分加入水内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,
煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,调节pH值使灭菌后为7.1±0.2,分装,
灭菌。
在供试品接种前, 培养基指示剂氧化层的颜色不得超过培养基深度约1/5,否则,须
经水浴煮沸加热, 只限加热一次。
2.真菌培养基
胨 5g 磷酸氢二钾 1g
酵母浸出粉 2g 硫酸镁 0.5g
葡萄糖 20g 水 1000ml
除葡萄糖外,取上述成分加入水内,微温溶解后,调节pH值约为6.8,煮沸,加葡萄
糖溶解后,摇匀,滤清,调节pH值使灭菌后为6.4±0.2,分装,灭菌。
3.选择性培养基
(1) 对氨基苯甲酸培养基(用于磺胺类药物的无菌检查) 照上述需气菌、厌气菌
培养基及真菌培养基的处方及制法,各加对氨基苯甲酸0.125g,溶解后,摇匀,分装,灭
菌。
(2) 聚山梨酯80培养基(用于油剂药品的无菌检查) 照上述需气菌、厌气菌培养基
及真菌培养基的处方及制法,各加10ml聚山梨酯80,摇匀,分装,灭菌。
4.营养肉汤培养基
胨 10g 肉浸液 1000ml
氯化钠 5g
取胨和氯化钠加入肉浸液内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,调节pH
值使灭菌后为7.2±0.2,分装,灭菌。
5.营养琼脂培养基
照上述营养肉汤培养基的处方及制法,加入15~20g琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2
±0.2,分装,灭菌。
6.0.5%葡萄糖肉汤培养基
胨 10g 葡萄糖 5g
氯化钠 5g 肉浸液 1000ml
取胨和氯化钠加入肉浸液内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,加葡萄糖溶解
后,摇匀,滤清,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,灭菌。
7.真菌琼脂培养基
照真菌培养基的处方及制法,加入15~20g琼脂,调节pH值使灭菌后为6.4±0.2,分
装,灭菌,趁热斜放使凝固成斜面。
上述培养基分别按15ml与40ml或需要量分装于试管功其他容器中,装量约为试管或
容器高度的2/5,按规定的温度和时间灭菌。细菌培养基经30~35℃培养48小时,真菌培
养基经20~25℃培养72小时后,应无菌生长。
【附注】 肉浸液制备法 取新鲜牛肉,除去肌腱及脂肪,切细,绞碎后,每1000
g加水3000ml,充分拌匀,在2~10℃浸泡20~24小时,煮沸1小时,滤过,压干肉渣,补
足液量,分装,灭菌,置冷暗处备用。也可用牛肉浸出粉3g,加水1000ml,配成溶液代
替。
培养基质量应通过灵敏度检查。
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