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O157检验增菌与分离



录入时间:2014-12-4 11:52:14 来源:银河澳门官网入口

增菌

         以无菌操作取检样25g(mL)加入到含有225mL mEC+n肉汤的均质袋中,在拍击式均质器上连续均质1~2 min。于36±1℃培养18~24h。同时做阳性及阴性对照。

 

      无菌操作,阴阳行对照避免交叉污染。

      1000mL增菌培养基中加1mL新生霉素储备液,使最终浓度为20mg/L。

分离

      取增菌后或筛选试验阳性的mEC+n肉汤,分别划线或适当稀释后取0.1mL涂布接种于CT-SMAC平板和改良CHROMagar O157显色琼脂平板上,于36±1℃培养18~24h,观察菌落。必要时将混合菌落分纯。在CT-SMAC平板上,发酵山梨醇的菌落为红色;典型菌落为不发酵山梨醇的圆形、光滑、较小的无色菌落,中心呈现较暗的灰褐色,用接种针挑起时无拉丝现象。在改良CHROMagar O157显色琼脂平板上为圆形、较小的菌落,中心呈淡紫色-紫红色,边缘无色或浅灰色。

取1000ml灭菌融化并冷却至45℃±1℃的山梨醇麦康凯(SMAC)琼脂, 加入1 ml亚碲酸钾溶液和10mL头孢克肟溶液,混匀后倾注平板。


亚碲酸钾最终浓度达到2.5mg/L,头孢克肟最终浓度达到0.05mg/L。


 

 


 

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