增菌

         以无菌操作取检样25g(mL)加入到含有225mL mEC+n肉汤的均质袋中，在拍击式均质器上连续均质1～2　min。于36±1℃培养18～24h。同时做阳性及阴性对照。

      无菌操作，阴阳行对照避免交叉污染。

      1000mL增菌培养基中加1mL新生霉素储备液，使最终浓度为20mg/L。

分离

      取增菌后或筛选试验阳性的mEC+n肉汤，分别划线或适当稀释后取0.1mL涂布接种于CT-SMAC平板和改良CHROMagar O157显色琼脂平板上，于36±1℃培养18～24h，观察菌落。必要时将混合菌落分纯。在CT-SMAC平板上，发酵山梨醇的菌落为红色；典型菌落为不发酵山梨醇的圆形、光滑、较小的无色菌落，中心呈现较暗的灰褐色，用接种针挑起时无拉丝现象。在改良CHROMagar O157显色琼脂平板上为圆形、较小的菌落，中心呈淡紫色-紫红色，边缘无色或浅灰色。

取1000ml灭菌融化并冷却至45℃±1℃的山梨醇麦康凯(SMAC)琼脂, 加入1 ml亚碲酸钾溶液和10mL头孢克肟溶液，混匀后倾注平板。

亚碲酸钾最终浓度达到2.5mg/L，头孢克肟最终浓度达到0.05mg/L。

上一篇：O157检验方法的条件优化

下一篇：O157生化试验与注意事项