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乳酸菌的鉴定



录入时间:2014-11-26 11:50:27 来源:银河澳门官网入口

用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1.0 mL,沿管壁缓慢注于装有9 mL0.85%生理盐水的无菌试管中(注意吸管尖端不要触及稀释液),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。

另取1 mL无菌吸管或微量移液器吸头,按上述操作顺序,做10倍递增样品匀液,如此每递增稀释一次,即换用1次1 mL灭菌吸管或吸头。

根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取0.1 mL稀释液于MRS琼脂平板或MC琼脂平板进行表面涂布,每个稀释度作两个平皿。MC琼脂平板用于嗜热链球菌的计数。含双歧杆菌的样品需绝对厌氧,置36 ℃±1 ℃恒温箱内培养48 h±2 h,不含双歧杆菌的样品需兼性厌氧,置36 ℃±1 ℃恒温箱内培养48 h±2 h,培养后选取菌落数在30~300之间的平板进行计数。乳酸菌在MRS和MC培养基上菌落生长形态特征。


纯培养

         挑取3个或以上的可疑菌落,嗜热链球菌接种于MC琼脂平板,乳杆菌属和双歧杆菌属接种于MRS琼脂平板,双歧杆菌需绝对厌氧,置36 ℃±1 ℃恒温箱内培养48 h±2 h,不含双歧杆菌需兼性厌氧,置36 ℃±1℃恒温箱内培养48 h±2 h。

鉴定

         涂片镜检:乳杆菌属细胞形态多样,从长的杆状和细长杆状到弯曲杆状及短杆状,一般形成链。通常不运动。无芽胞,革兰氏染色阳性。嗜热链球菌形态为球形或球杆状,直径为0.5 μm~2.0 μm,细胞成对或成链排列,无芽胞,革兰氏染色阳性。双歧杆菌属细胞呈多样形态,有较规则短杆状或纤细杆状具有尖细末段的细胞,也有呈球形者,可形成各种分支或分叉形。无芽胞,革兰氏染色阳性。

 

 


 

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