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平板菌落计数法样品稀释



录入时间:2014-11-20 11:48:54 来源:银河澳门官网入口

固体和半固体样品:称取25g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,5 000r/min~10 000r/min 均质1 min~2 min ,或放人盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min ,制成1:10 的样品匀液。

液体样品:以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1 :10 的样品匀液。 6.1.3 用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1: 10 样品匀液1 mL ,沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用一支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液。

按上述操作程序,制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用一次1 mL 无菌吸管或吸头。

根据对样品污染状况的估计,选择2 个~3 个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液), 在进行10 倍递增稀释时,每个稀释度分别吸取1 mL 样品匀液加人两个无菌平皿内。同时分别取1 mL 稀释液加人两个无菌平皿作空白对照。

及时将15 mL~20 mL 冷却至46 ℃ 的平板计数琼脂培养基(可放置于46 ℃±1 ℃ 恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。

 


 

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