操作步骤

1 增菌

      用无菌操作取样品25g，加入有225mL的增菌液中（银耳取样品1g，加入有20mL的增菌液中）置于36±1℃恒温培养箱中培养48h。

2 平板分离

      取增菌液1环，划线按种PDA平板， 36±1℃培养24~48h。

      PDA平板：菌落1~2mm，灰白色或乳白色，光滑、湿润、边缘整齐。培养48h后，中心有凸起，呈草帽状，菌落周围有黄绿色素扩散到基质中。

      卵黄琼脂平板：菌落表面光滑、湿润，48h后，菌落周围形成乳白色混浊环，斜射日光下可见环的表面呈虹彩现象。

      SS琼脂平板：不生长或微弱生长。

3 纯化

         从卵黄琼脂平板上挑取卵黄脂酶阳性，并带有虹彩环的单个菌落，接种PDA斜面， 36±1℃培养24h。

4 生化试验

       从纯化培养的PDA斜面上挑取少量菌苔，分别接种于Hugh－Leifson培养基、蛋白胨水、缓冲蛋白胨水、西檬氏柠檬酸盐培养基、糖发酵管及苯丙氨酸培养基， 36±1℃培养，按单项试验要求分别进行观察。

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